攜帶者狀態(tài)對(duì)新生兒串聯(lián)質(zhì)譜遺傳代謝病篩查結(jié)果的影響

2021-12-31

導(dǎo)讀

串聯(lián)質(zhì)譜（MS/MS）技術(shù)已經(jīng)廣泛應(yīng)用于新生兒遺傳代謝病篩查項(xiàng)目，但存在假陽(yáng)性率較高的問(wèn)題。根據(jù)大樣本匯總分析的結(jié)果，我國(guó)串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)用于新生兒遺傳代謝病篩查的初篩陽(yáng)性率約為1.91%，而最終確診陽(yáng)性率僅為0.04%，即每1萬(wàn)例新生兒中，約有191例初篩為陽(yáng)性，經(jīng)召回復(fù)查及進(jìn)一步檢測(cè)，最終僅有4例確診。造成串聯(lián)質(zhì)譜篩查假陽(yáng)性結(jié)果的因素有很多，本期我們探討攜帶者狀態(tài)對(duì)于篩查結(jié)果的影響。

什么是攜帶者狀態(tài)

絕大多數(shù)遺傳代謝病為常染色體隱性遺傳模式，即只有當(dāng)同源染色體上的兩份基因拷貝均發(fā)生變異時(shí)才會(huì)導(dǎo)致疾病的發(fā)生，而僅有1份拷貝發(fā)生變異不會(huì)致病，此時(shí)稱(chēng)之為攜帶者（carrier）或攜帶者狀態(tài)（carrier status）。

攜帶者狀態(tài)對(duì)新生兒串聯(lián)質(zhì)譜篩查結(jié)果的影響

由于正常等位基因的劑量補(bǔ)償效應(yīng)，遺傳代謝病基因變異攜帶者不會(huì)患病，但與完全正常人群相比，其酶活性或多或少會(huì)受到一定程度的影響。對(duì)于新生兒遺傳代謝病串聯(lián)質(zhì)譜篩查，這種影響可能會(huì)體現(xiàn)在特定疾病相應(yīng)指標(biāo)出現(xiàn)異常，尤其是對(duì)于那些指標(biāo)特異性較差的疾病，如中鏈酰基輔酶A脫氫酶缺乏癥（MCADD）和極長(zhǎng)鏈?；o酶A脫氫酶缺乏癥（VLCADD）等。

01 中鏈?；o酶A脫氫酶缺乏癥（MCADD）

發(fā)表在《J Inherit Metab Dis》雜志，題為“Genotype and residual enzyme activity in medium-chain acyl-CoA dehydrogenase (MCAD) deficiency: Are predictions possible?”的研究[1]，報(bào)道了460例串聯(lián)質(zhì)譜篩查疑似MCADD的新生兒，通過(guò)酶活性檢測(cè)和/或基因檢測(cè)進(jìn)行確診，并分析了基因型和酶活性的相關(guān)性。在388例進(jìn)行了酶活性檢測(cè)的新生兒中，196例酶活性介于0%-30%（疑似患者），21例酶活性介于30%-35%（疑似患者或攜帶者），88例酶活性介于35%-50%（疑似攜帶者），其余酶活性>50%（疑似正常）。171例新生兒同時(shí)進(jìn)行了基因檢測(cè)（44%），確診57例為攜帶者。粗略推算因攜帶者狀態(tài)導(dǎo)致的假陽(yáng)性比例在40%以上。

02 極長(zhǎng)鏈?；o酶A脫氫酶缺乏癥（VLCADD）

同樣發(fā)表在《J Inherit Metab Dis》雜志，題為“The diagnostic challenge in very-long chain acyl-CoA dehydrogenase deficiency (VLCADD)”的研究[2]，報(bào)道了403例串聯(lián)質(zhì)譜篩查疑似VLCADD的新生兒，采用酶活性檢測(cè)和/或基因檢測(cè)進(jìn)行確診。55例酶活性介于0%-23%（疑似患者），7例酶活性介于24%-26%（疑似患者或攜帶者），138例酶活性介于27%-50%（疑似攜帶者），203例酶活性>50%（疑似正常）。108例酶活性<40%的新生兒同時(shí)進(jìn)行了基因檢測(cè)，確診44例為攜帶者。粗略推算因攜帶者狀態(tài)導(dǎo)致的假陽(yáng)性比例接近40%。

03 血?；鈮A水平是否可提示攜帶者狀態(tài)？

血辛酰肉堿（C8）及C8/C10比值增高是串聯(lián)質(zhì)譜篩查MCADD的主要診斷指標(biāo)，那這兩個(gè)指標(biāo)是否可用來(lái)初步區(qū)分患者與攜帶者呢？在上述的MCADD研究中，研究人員做了酶活性與各個(gè)指標(biāo)相關(guān)性的分析。如下圖所示，酶活性介于0%-10%的MCADD患者，其串聯(lián)質(zhì)譜C8和C8/C10值均顯著高于其他個(gè)體，但存在一定程度的交叉；而酶活性介于10%-30%的患者，與攜帶者和正常個(gè)體相比，沒(méi)有顯著差異。因此，通過(guò)C8和C8/C10數(shù)值進(jìn)行患者和攜帶者的區(qū)分是不可行的。

思考與總結(jié)

攜帶者狀態(tài)是導(dǎo)致新生兒串聯(lián)質(zhì)譜MCADD和VLCADD篩查假陽(yáng)性結(jié)果的主要原因之一。由于酶活性檢測(cè)的普及率較低，基因檢測(cè)是目前確診的主要手段。但匯總既往研究報(bào)道[3-5]，我國(guó)MCADD患兒基因診斷的靈敏度僅為78.9%（匯總分析的38例經(jīng)臨床、血生化、血肉堿或尿有機(jī)酸檢測(cè)等確診的患兒中，8例僅檢測(cè)到單雜合變異），這與本文提到的國(guó)外研究存在較大差異。因此，在應(yīng)用基因檢測(cè)技術(shù)對(duì)串聯(lián)質(zhì)譜篩查陽(yáng)性的MCADD患兒進(jìn)行輔助診斷時(shí)，如果僅檢出單雜合變異，除考慮攜帶者狀態(tài)造成的假陽(yáng)性可能外，也不能排除基因檢測(cè)假陰性的可能。而對(duì)于VLCADD，我國(guó)患兒基因診斷的靈敏度接近100%[6-8]，因此，檢出單雜合變異時(shí)不需要考慮假陰性的可能。

參考文獻(xiàn)：

1. Tucci S, Wagner C, Grünert SC, et al. Genotype and residual enzyme activity in medium-chain acyl-CoA dehydrogenase (MCAD) deficiency: Are predictions possible?. J Inherit Metab Dis. 2021;44(4):916-925.

2. Hesse J, Braun C, Behringer S, Matysiak U, Spiekerkoetter U, Tucci S. The diagnostic challenge in very-long chain acyl-CoA dehydrogenase deficiency (VLCADD). J Inherit Metab Dis. 2018;41(6):1169-1178.

3. Gong Z, Liang L, Qiu W, et al. Clinical, Biochemical, and Molecular Analyses of Medium-Chain Acyl-CoA Dehydrogenase Deficiency in Chinese Patients. Front Genet. 2021;12:577046.

4. Li Y, Zhu R, Liu Y, Song J, Xu J, Yang Y. Medium-chain acyl-coenzyme A dehydrogenase deficiency: Six cases in the Chinese population. Pediatr Int. 2019;61(6):551-557.

5. 童凡, 蔣萍萍, 楊茹萊,等. 中鏈?；o酶A脫氫酶缺乏癥新生兒篩查及隨訪(fǎng)研究[J]. 中國(guó)當(dāng)代兒科雜志, 2019, 21(1):6.

6. 曹金俊, 邱文娟, 章瑞南,等. 極長(zhǎng)鏈?；o酶A脫氫酶缺乏癥11例的臨床和ACADVL基因突變譜分析[J]. 中華兒科雜志, 2015(4):6.

7. Li X, Ma R, Liu Y, et al. One potential hotspot ACADVL mutation in Chinese patients with very-long-chain acyl-coenzyme A dehydrogenase deficiency. Clin Chim Acta. 2020;503:218-222.

8. 錢(qián)古柃，洪芳，童凡，等. 極長(zhǎng)鏈?；o酶A脫氫酶缺乏癥16例臨床及基因型分析[J]. 兒科藥學(xué)雜志, 2020, 26(9):4.

（部分圖片來(lái)源網(wǎng)絡(luò)，如有侵權(quán)請(qǐng)聯(lián)系刪除）